• Palpación y Ecografía para estimar número de cuerpos lúteos.
• Anestesia epidural.
• Higiene de la vulva y zonas adyacentes.
• Secado.
• Introducción de un brazo por vía rectal.
• Introducción de la sonda Foley vía vaginal.
• Pasamos vagina, cervix, cuerpo y llegamos al cuerno.
• Retiramos un poco el estilete.
• Inflamos el balón con medio de lavado (PBS).
• Sacamos el estilete.
• Liberamos medio y lavamos el cuerno.

MATERIALES

Mangas de palpación; Guantes de látex; Lactato de Ringer; PBS (Medio de lavado); Sondas Foley; Estiletes; Medios de conducción; Filtros (Minitube); Cajas de Petri; Alcohol; Jeringas; Lidocaína (Sin epinefrina).

PROCEDIMIENTO

Palpamos los ovarios por vía rectal para comprobar la respuesta al tratamiento de superovulación. Luego de la palpación se puede hacer uso del ecógrafo. Si la respuesta fue positiva procedemos a pasar la sonda Foley y a lavar los cuernos.

Una vez hayamos lavado los dos cuernos llevamos el filtro al laboratorio improvisado en la finca para comenzar su busqueda y clasificación.

Se buscan los embriones y estructuras infertilizadas con magnificación 15x. Una vez encontrados se separan los ovocitos infertilizados y los embriones degenerados de los buenos o viables. Los embriones viables se llevan a otra caje de Petri con medio PBS y una vez haya terminado la busqueda y clasificación se lavan 10 veces.

Si los embriones van a ser transferidos en fresco se empajillan en medio PBS y si van a ser congelados se empajillan en Etilenglicol (EG). En este caso vamos a preparar los embriones para congelarlos..

El empajillado del embrion es muy sencillo. Para ello vamos a utilizar una jeringa de insulina y una punta de pipeta. Ponemos la pajilla esteril dentro de la punta de pipeta y con la jeringa aspiramos una columna de medio, luego una columna de aire, nuevamente una columna de medio y una columna de aire. Teniendo dos columnas de medio y dos columnas de aire aspiramos el embrion con su respectivo medio (PBS o EG) y repetimos el procedimiento anterior. Una vez empajillados los embriones hacemos uso de la congeladora.

Cargamos la congeladora con nitrógeno líquido y ponemos las escalerillas y los goblets que luego van a contener los embriones en el termo criogénico.

Con un hisopo de algodón aplicamos un poco de nitrógeno líquido en las puntas de la pajilla. Esto evita que al congelar la pajilla se formen cristales que dañen el embrión. Luego de esto procedemos al congelamiento gradual de los embriones primero a -6°C; luego a -32°C y por último a -196°C.

Hay que tener presente que los embriones congelados deben ir siempre en las canastillas de abajo e inmersos en nitrógeno. Este procedimiento debe ser desarrollado por un profesional. El objetivo de este artículo es estrictamente didáctico pues la técnica de colecta, congelación y transferencia de embriones es más compleja de lo que se puede mostrar en medios audiovisuales.

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